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技術(shù)文章

Technical articles

2015
10-29

成功完成WB檢測(cè)，必須滿足的4個(gè)條件
免疫印跡（immunoblotting）又稱蛋白質(zhì)印跡（Westernblotting），是根據(jù)抗原抗體的特異性結(jié)合檢測(cè)復(fù)雜樣品中的某種蛋白的方法。該法是在凝膠電泳和固相免疫測(cè)定技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一種新的免疫生化技術(shù)。由于免疫印跡具有SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫測(cè)定的高特異性和敏感性，現(xiàn)已成為蛋白分析的一種常規(guī)技術(shù)。免疫印跡常用于鑒定某種蛋白，并能對(duì)蛋白進(jìn)行定性和半定量分析。結(jié)合化學(xué)發(fā)光檢測(cè)，可以同時(shí)比較多個(gè)樣品同種蛋白的表達(dá)量差異。成功完成WesternBlot檢...
2015
10-26

上海恒遠(yuǎn)解說(shuō)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的技術(shù)手段和實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
時(shí)光匆匆而過(guò)，十月進(jìn)入尾聲，即將迎來(lái)購(gòu)物狂潮“雙11”，在十月購(gòu)我司ELISA試劑盒的老師多個(gè)選擇我司待測(cè)，在實(shí)驗(yàn)中我司技術(shù)整理了相關(guān)實(shí)驗(yàn)技術(shù)，下面我們就來(lái)看看：上海恒遠(yuǎn)解說(shuō)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的技術(shù)手段和實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備！1、其抗原抗體反應(yīng)具有高度的特異性。2、將酶催化反應(yīng)的放大作用和抗原抗體親和反應(yīng)的高度專一性、特異性相結(jié)合，以酶標(biāo)記的抗原或抗體作為主要試劑進(jìn)行免疫測(cè)試，所以具有很高的靈敏度。3、實(shí)現(xiàn)了在細(xì)胞或亞細(xì)胞水平上示蹤抗原或抗體的所在部位，或在微克、甚至納克水平上對(duì)其進(jìn)...
2015
10-22

恒遠(yuǎn)技術(shù)講解:ELISA空白孔顯現(xiàn)陽(yáng)性的原因
近日，上海大學(xué)金老師實(shí)驗(yàn)后來(lái)電向我司咨詢ELISA空白孔為什么顯現(xiàn)陽(yáng)性？金老師的實(shí)驗(yàn)流程大致是：包被放置一晚4攝氏度12小時(shí)-一抗65分鐘-二抗45分鐘-顯色15分鐘“-"表示洗板，洗五次，每次3min?？瞻卓诪椴话?，加一抗和二抗，結(jié)果空白孔比陽(yáng)性值還高。通過(guò)了解我司技術(shù)人員經(jīng)過(guò)詳細(xì)分析后給出以下幾種可能：1.手工洗板嗎，臨近空白孔的標(biāo)準(zhǔn)品濃度zui高，有可能甩液體的時(shí)候沒(méi)注意，標(biāo)準(zhǔn)孔的倒流到空白孔去了哦！2.如果沒(méi)有封閉，有可能是未經(jīng)過(guò)封閉的板子對(duì)一抗有吸附作用，吸附一抗...
2015
10-21

ELISA加樣時(shí)移液槍的正確使用方法
大家經(jīng)常會(huì)討論移液的問(wèn)題，這個(gè)步驟在ELISA實(shí)驗(yàn)中的卻是比較重要的。在加樣品和加顯色液的時(shí)候是定量的，產(chǎn)生氣泡可能會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響蠻大的?？傊?，掌握微量加樣器加樣必須注意的關(guān)鍵點(diǎn)是可以幫助您在實(shí)驗(yàn)中避免不必要的麻煩。1.加樣不可太快，要避免加在孔壁上部，不可濺出和產(chǎn)生氣泡。加樣太快，無(wú)法保證微量加樣的準(zhǔn)確性和均一性。加在孔壁上部的非包被區(qū)，易導(dǎo)致非特異吸附。濺出會(huì)對(duì)鄰近孔產(chǎn)生污染。出現(xiàn)氣泡則反應(yīng)液界面有差異。2.試劑的加入在國(guó)產(chǎn)試劑盒中基本上均是從滴瓶中滴加，除了要注意滴加...
2015
10-14

實(shí)驗(yàn)必知:ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)條件的選擇
在ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中，進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的，其中包括:（1）固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進(jìn)行篩選：用等量抗原包被，在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng)，觀察其顯色反應(yīng)是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。（2）包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時(shí)，要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0～9.6之...
2015
10-9

實(shí)驗(yàn)新手如何獨(dú)立看懂ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果
ELISA測(cè)定按其表示測(cè)定結(jié)果的方式分為定性和定量測(cè)定兩大類。定性測(cè)定只是對(duì)標(biāo)本中是否含有待測(cè)抗原或抗體作出“有”或“無(wú)”的結(jié)論，分別用“陽(yáng)性”和“陰性”來(lái)表示?？梢?jiàn)定性測(cè)定通常是用于傳染性病原體的抗原或抗體的測(cè)定，以判斷特定病原體感染的存在與否。而定量測(cè)定則是對(duì)標(biāo)本中待測(cè)抗原的多少進(jìn)行量值測(cè)定，以具體數(shù)值表示。定量測(cè)定基本上是用于非病原體抗原物質(zhì)的測(cè)定，如激素、細(xì)胞因子、腫瘤標(biāo)志物、小分子藥物等。FP，hCG、細(xì)胞因子等的定量測(cè)定。ELISA定性測(cè)定的“陰性”和“陽(yáng)性”的判...
2015
9-29

科研試劑使用注意事項(xiàng)
試劑是試驗(yàn)、研究開(kāi)發(fā)方面*的化學(xué)物質(zhì)。但有些試劑會(huì)因操作有誤而引起意想不到的事故。這樣的試劑大體可分為具有引發(fā)火災(zāi)，爆炸的危險(xiǎn)性;因裸露而對(duì)人體產(chǎn)生傷害的有害特性;以及保管中因自然分解而引發(fā)意想不到的事故的危險(xiǎn)性。當(dāng)然，有些試劑同時(shí)具有多種危險(xiǎn)特性。因此，在使用時(shí)必須注意安全，從開(kāi)封，保管，直到廢棄，希望實(shí)施責(zé)任制管理。要認(rèn)識(shí)到所有的試劑都具有“不被人知的危險(xiǎn)有害性”，防止化學(xué)事故發(fā)生?！褓?gòu)買(mǎi)后，請(qǐng)務(wù)必確認(rèn)標(biāo)簽上的注意事項(xiàng)?！褡龊妙A(yù)防顛倒，摔壞的措施和管理體制。●在使用前再次...
2015
9-24

未使用完的96孔板試劑盒該作何處理
ELISA試劑盒包裝規(guī)格的大小取決于試劑盒里面酶標(biāo)板的規(guī)格大小，常見(jiàn)的有96T(12孔乘以8條)跟48T（12孔乘以4條）兩種。所以當(dāng)您在選擇ELISA試劑盒的時(shí)候考慮自己樣本的收集量再做選擇，以免造成浪費(fèi)。也許您會(huì)想剩余沒(méi)用完的板可以再保存等下次實(shí)驗(yàn)重新使用。我司技術(shù)卻不贊同該做法，不僅僅是因?yàn)榛厥盏陌遄訉?duì)后面實(shí)驗(yàn)會(huì)造成比較大的誤差。所以選購(gòu)ELISA是應(yīng)該考慮另外兩個(gè)問(wèn)題：一、經(jīng)濟(jì)：一塊96孔板，進(jìn)口的也貴不到哪去，國(guó)產(chǎn)的更便宜，你重復(fù)利用，這么一折騰，時(shí)間，精力以及洗板...

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